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培養(yǎng)基的基礎(chǔ)使用步驟有幾步

更新日期: 2021-04-19
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  培養(yǎng)基是供微生物、植物組織和動(dòng)物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。
  培養(yǎng)基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后,易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì),因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。
  使用培養(yǎng)基的方法
  1.瓊脂培養(yǎng)基的融化
  將培養(yǎng)基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高壓鍋中的蒸汽)融化。經(jīng)過高壓滅菌的培養(yǎng)基盡量減少重新加熱的時(shí)間,避免過度加熱。培養(yǎng)基融化后立即移開,室溫靜置片刻(約2min),以免玻璃容器發(fā)生破裂。
  融化后的培養(yǎng)基放入47℃~50℃恒溫水浴鍋中保溫,冷卻到47℃~50℃所需的時(shí)間取決于培養(yǎng)基的類型、體積和在水鍋里的分裝量。融化后內(nèi)培養(yǎng)基應(yīng)盡快使用,放置時(shí)間一般不超過4h。剩余的培養(yǎng)基固后不得再次融化使用。特別是靈敏性培養(yǎng)基,應(yīng)根據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),縮短融化后放置的時(shí)間。
  將瓊脂培養(yǎng)基倒入類似檢測培養(yǎng)使用的獨(dú)立容器中,插入溫度計(jì),記錄并保存瓊脂的融化溫度。
  加入樣品的培養(yǎng)基應(yīng)將溫度調(diào)節(jié)到44℃~47℃,或按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)調(diào)節(jié)溫度。
  2.培養(yǎng)基的脫氣
  必要時(shí),在使用前將養(yǎng)基放到沸水浴或蒸汽浴中加熱15min,加熱時(shí)松開容器蓋子;加熱后蓋緊蓋子,并迅速冷卻至使用溫度。
  3.添加成分的加入
  對熱不穩(wěn)定的添加成分應(yīng)在培養(yǎng)基冷卻至47℃~50℃時(shí)加入,滅菌的添加成分加入前應(yīng)冷卻至室溫,避免冷的液體會(huì)造成瓊脂凝膠或形成片狀物。將添加成分慢加入培養(yǎng)基并充分混勻,盡快分裝到待用的容器中。
  4.培養(yǎng)基的棄置
  所有污染和未使用的培養(yǎng)基的棄置應(yīng)采用安全的方式,并符合相關(guān)法律法規(guī)的規(guī)定。
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